2.2.2 FACTORES QUE INTERVIENEN EN EL PROCESO
DE ESTERILIZACION
Existen diferentes procedimientos que se emplean para destruir gérmenes
patógenos y no patógenos. A través de estos, alcanzan un estado de desinfección
que evita la contaminación.
Cabe
mencionar que el calor Húmedo (autoclave): produce
desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se deben
principalmente a dos razones:
Ø El agua
es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son
producidas por reacciones que eliminan agua.
Ø El vapor
de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el
aire. Los materiales deberán disponerse de tal manera que se asegure el intimo
contacto de todas sus partes con el vapor.
Se realiza la esterilización por el
vapor de agua a presión. Se esteriliza a 121ºc durante 20 minutos a una presión
de 15 PSI (1.2 kg/cm2).
BIBLIOGRAFIA:
http://html.rincondelvago.com/esterilizacion_1.html.
2.3 ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO
DE TEJIDOS
El establecimiento más que
nada consiste en la desinfección de los explantes (generalmente con hipoclorito
de sodio) y su posterior adaptación al medio artificial de modo de inducir
callo, brote, raíz o embrión somático, según se desee. Se requiere desinfectar
superficialmente el material escogido para evitar que en el medio de cultivo
crezcan microorganismos, principalmente bacterias y hongos, que competirán
ventajosamente con el explante.
Para el establecimiento de los cultivos utilizando cualquiera de los sistemas
es necesario tener en cuenta algunos aspectos generales comunes relacionados
con el explante, la asepsia, el medio de cultivo y las condiciones de
incubación.
2.3.1
ETAPAS DEL CULTIVO DE TEJIDOS
El cultivo de tejidos
vegetales es el proceso que se inicia con un explante y termina con la
obtención de plantas completas, lo que involucra una serie de etapas, las
cuales se enumeran a continuación:
ü Elección de la planta y/o tejido donante de explantes. En esta fase se
incluyen los tratamientos, preparación y selección de las plantas madre a
partir de las cuales se inicia el cultivo, siendo imprescindible comprobar la y
su estado de salubridad
ü Establecimiento: consiste en la desinfección de los explantes y su
posterior adaptación al medio artificial de modo de inducir callo, brote, raíz
o embrión somático, según se desee. Se requiere desinfectar superficialmente el
material escogido para evitar que en el medio de cultivo crezcan
microorganismos que competirán ventajosamente con el explante.
ü Multiplicación: consiste en generar una cantidad de masa vegetal
suficiente para la regeneración del número de plantas necesarias.
ü Enraizamiento: es el proceso de inducción de la formación de raíces con
el fin de convertir a los brotes o embriones somáticos en plántulas completas
ü Rusticación: es el paso de aclimatación de las
plántulas obtenidas in vitro a las condiciones del ambiente usuales
fuera del tubo o frasco, es decir al suelo o algún sustrato inerte.
BIBLIOGRAFIA: ArgenBio. 2007. Cultivo
in vitro de plantas y su relación con la Biotecnología.
2.3.2
SELECCIÓN DE PLANTAS MADRE
La selección de
plantas madres orientada a la producción de clones de calidad es una búsqueda
que requiere de tiempo y paciencia, pero que se ve recompensada con una
producción continua de clones 100% hembra de primera calidad y de buena hierba.
Con la selección de
plantas madre se pretende elegir a los individuos con características más
deseables para que funjan como progenitores.
BIBLIOGRAFIA:www.cannabismagazine.es/digital/articulos/22/916-plantas-madre-seleccion-y-cuidados.
2.3.3 EXPLANTE
Un explante es cualquier
parte vegetal que ha sido separada de la planta original, que puede ser un
tejido (fragmentos de hojas, tallos, raíces, pétalos, etc.), un órgano
(semillas, anteras, ovarios, botones florales, hojas y raíces completas), los
explantes están constituidos por tejidos y/o células somáticas.
El nombre “explante”
es una versión castellanizada del vocablo inglés “explant”; acuñado
especialmente para identificar a los tejidos vegetales cultivados in vitro y
sin otro significado.
Manual de Cultivo de Tejidos Vegetales para Ingenieros Biotecnólogos.
Isidro Ovando Medina.
BIBLIOGRAFIA:
Manual de Cultivo de Tejidos Vegetales para Ingenieros Biotecnólogos.
Isidro Ovando Medina.
http://exa.unne.edu.ar/biologia/fisiologia.vegetal/Manual%20c%20in%20v.pdf
